RESUMEN

La oxidación del complejo de inclusión bilirrubina indirecta (BI) con a y b-ciclodextrinas (CD) en solución acuosa, a pH 7,4 y a temperatura de 37°C se estudió por voltametría de pulso normal (VPN) y voltametría de pulso diferencial (VPD), utilizando como electrodo de trabajo carbón vítreo. Los resultados obtenidos demuestran que la adición de las ciclodextrinas, a concentraciones variables, determina un desplazamiento voltamétrico del potencial de media onda de la BI vs Ag/AgCl (KCl 0,1 M), lo cual indica la formación del correspondiente complejo de inclusión. El análisis de los datos, por medio de la ecuación de Lingane, da un valor estequiométrico de 1:1 para los complejos a y b-CD-BI y un valor de constante de formación, KF, de 1538 para el complejo  a-CD-BI y de 2598 para el complejo b-CD, en las condiciones en las cuales se realizaron los experimentos. Se discuten los resultados obtenidos y se sugiere que la administración de la CD por vía rectal o intravenosa pudiera favorecer la depuración plasmática de la BI, una sustancia muy tóxica, que se elimina fundamentalmente por conjugación a nivel del hepatocito, la cual determina la aparición del kernicterus (ictericia nuclear) en recién nacidos prematuros o a término cuando ella se acumula en el plasma en gran cantidad.

RESUMEN

En el presente trabajo se empleó una precolumna LiChrospher RP-18 ADS (alquil diol sílica) inserta en un sistema de columnas acopladas bajo la modalidad de transferencia indirecta reversa como etapa de tratamiento en línea para la determinación de vitaminas K¹ y MK-4por CLAR en detección por fluorescencia. Las muestras de plasma humano se inyectaban directamente en la precolumna con una fase de extracción constituida por 2-propanol/acetonitrilo 200 mM dodecilsulfato de sodio en buffer  fosfato 10mM pH= 7,4(20:25:55, v: v: v). La separación se realizó en una columna Novapack C18 (150mm * 3,9mm d.i. y 4mm d.p) utilizando como fase móvil A: agua/acetonitrilo (80:20, v/v) y como fase móvil B: metanol/acetonitrilo (65:35,v/v) en régimen de gradiente de elución a un flujo de 0,8 mL/min. Las vitaminas K¹ y MK-4 se redujeron en línea en una columna de zinc metálico y el producto se detectó por fluorescencia. La validación del método indicó linealidad entre 0,2 – 1,6 ng/mL, con un límite de cuantificación de 0,2 ng/mL para ambas vitaminas. La recuperación para todos los casos estuvo comprendida entre 90,5 y 112,0% con un C.V. <3,8%. Finalmente, el método propuesto se utilizó para analizar muestras de plasma de individuos sanos con una frecuencia de análisis de 4 muestras/hora.