Resumen
La fosfatasa alcalina (AP; EC 3.1.3.1) desfosforila compuestos monofosfatados a pH básico y es usada en estuches comerciales para el diagnóstico de enfermedades hepáticas, intestinales, óseas y endocrinas (hiperparatiroidismo). Una actividad AP excretada al medio de cultivo por Bacillus stearothermophilus fue aislada, identificada, purificada parcialmente y caracterizada. Las bacterias fueron inoculadas en medio líquido con triptona, extracto de levadura, adenosin-5-monofosfato y tampón glicina de sodio pH 10 a 55°C. La actividad AP obtenida de un filtrado libre de células luego de 120 h de cultivo, fue ensayada con 2 mM p-nitrofenilfosfato en 50 mM tampón glicina de sodio, pH 10 y 1,5 mM MgCl2. A los 20 min de incubación, la reacción fue detenida con 0,2 M NaOH y se cuantificó la liberación de p-nitrofenol a 410 nm. La AP fue purificada parcialmente por DEAE-celulosa, con una actividad específica de 0,3 µmol·min–1·mg. La actividad fue máxima a 60°C y pH 10, aunque se registró actividad hasta 80°C. La actividad AP fue estimulada por 1 mM MgCl2 e inhibida por 0,1 mM ZnCl2, 0,1 mM EDTA y 10 mM fosfato inorgánico. Se determinó un peso molecular (PM) de ~90 kDa mediante zimografía. Los resultados indican que la enzima aislada pudiera ser relevante en aplicaciones industriales, clínicas y biotecnológicas, por su resistencia térmica y alcalina.

Resumen
Los termófilos viven entre 40 y 70 °C y sus actividades enzimáticas son generalmente termorresistentes. Una cepa de termófilas degradadoras de dibenzotiofeno (DBT) como única fuente de C y S fue aislada y tras la obtención de biomasa en medio completo a 55°C, se cultivó en medio mineral suplementado con 0,36 o 10 µM de DBT. La sulfo-reducción se evidenció al adicionar 0,1 M FeSO4 a muestras del cultivo, observándose un precipitado pardo de FeS. El DBT remanente de los cultivos fue extraído con tolueno y cuantificado por cromatografía de gas (GC). Para comprobar si las enzimas encargadas de la sulfo-reducción eran liberadas al medio, el contenido de DBT presente en filtrados libres de células (FLC), extraídos con tolueno a 0 y 72 h de incubación, fue cuantificado por GC. Los resultados indicaron una degradación total de DBT luego de 72 h de incubación, tanto en los extractos a 0, 24 y 72 h, como en los extractos de los FLC a 0 y 72 h de cultivo, evidenciándose que la actividad enzimática es extracelular. El estudio de esta actividad resulta de interés para la biorremediación de áreas contaminadas con DBT, por ser éste un componente presente en crudos de petróleo.