RESUMEN

La Leucemia Linfoblástica Aguda (ILA) es el cáncer más frecuente en niños y adolescentes en nuestra población Zuliana. La leucemia Mieloide Crónica (LMC) ocurre de igual manera en adolescentes, adultos jóvenes y adultos. Extensos estudios epidemiológicos sugieren la presencia de varios factores relacionados con la susceptibilidad. Actualmente se acepta que factores ambientales genéticos también juegan un papel relevante en el desarrollo de la LLA. La forma adulta de la LMC se caracteriza por la presencia del Cromosoma Filadelfia como resultado de la traslocación brc / abl. La proteína de fusión BCR-ABL es inmunogénica y su secuencia de unión se encuentra restringida “in Vitro”, a ciertos patrones HLA calase I y II. Con el fin de evaluar las asociaciones positivas y negativas de los Alelos HLA-DRB1*/3*/4*/5* y DQB1* por PCR Olerup SSP^TM DQ-DR SSP Combi tray (Genovision) conjuntamente con los alelos HLA-DPA1, loci HLA-DPA*01,*02,*03 y 04, por PCR Olerup SSP^TM  DPA1, en 24 pacientes con LLA y 24 pacientes con LMC del Banco de Sangre del estado Zulia frente a 48 controles mestizos zulianos. La comparación de las frecuencias alélicas entre pacientes y controles, reflejaron una asociación negativa del alelo DRB1*13 y las LLA, con un riesgo relativo de 0,09 y una p corregida con Yates <0,004. La relación de homocigosis DRB 3*/4*/5*, en pacientes LLA fue 5/13/21% comparado con los controles sanos cuya relación fue 9/19/15%. El Alelo HLA-DRB1*14 resultó positivamente con las LMC con un riesgo relativo (RR) de 6,84 y una p corregida por Yates <0,001. Los Alelos HLA-DPA1*0105,RR = 6,17 HLA-DPA1*0106/RR = 14,84/ p corregida por Yates < 0,035, HLA-DPA1*0107/RR = 9,4/ p corregida por Yates < 0,030 y el HLA-DPA1*0108/RR = 3,18/ p corregida por yates < 0,048, resultaron asociados positivamente con la LLA. Los Alelos HLA-DPA1*010301-010302,RR = 0,02 y una p corregida por Yates < 0,01 y HLA-DPA1*020101-020106 con un RR = 0,03 y una p corregida por Yates < 0,05 resultaron protectores para las LLA. Se confirma la asociación negativa  entre el HLA-DRB1*13 y las LLA. Observamos igualmente una mayor homocigosis HLA-DRB4* en LLA. La asociación positiva entre el HLA-DRB*14 y la LMC ha sido previamente reportada en pacientes LMC. Es original la demostración de la susceptibilidad otorgada por el HLA-DPA1*0105 en LLA. Las diferencias observadas entre los reportes de asociaciones HLA-DP y las LLA pueden estar relacionadas a diferencias técnicas y poblacionales.

RESUMEN

Para el cultivo de amiba se utilizan diversos medios que emplean antibióticos para controlar el crecimiento bacteriano. El Imipenem, antibiótico batalactámico, actúa sobre la mayoría de los gérmenes presentes como flora fecal. Se optimizó el cultivo de Entamoeba histolytica/ dispar (EH/ED) utilizando Imipenem, comprobar la vialidad de la amiba con este antibiótico y extraer el ADN amibiano para tipificación. Se inocularon 22 tubos con el medio de Boeck y Drbohlav con 1g de heces positivas para EH/ED, a 12 de ellos se agregó 200 µL de Imipenem (25mg/mL) al inicio y 50 µL diarios y a los 10 restantes 150 µL de una combinación de Penicilina, AmiKacina y Eritromicina (50 µL de cada uno). Se verificó el crecimiento y viabilidad parasitaria mediante tinción con eosina al 1% y contaje en cámara de Neubwer a las 24, 48, 72 horas y 7mo día, con resiembra y lecturas en iguales intervalos. Se extrajo el ADN mediante Kit Wizar SV Genomic de PromegaÒ  y se amplificó con indicadores genéricos. Se obtuvo una diferencia significativa entre el número de parásitos vivos de los cultivos con Imipenem = 6,6x10⁶, 11x10⁶, 17x10⁶ y 21x10⁶ vs. la combinación de Penicilina, Amikacina y Eritromicina = 1x10⁶, 2,8x10⁶, 3,3x10⁶ y 3,3x10⁶ a las 24, 48, 72 horas y 7° días respectivamente (p< 0,05). Se realizó la extracción del ADN y se amplificó con iniciadores genéricos obteniendo una banda de 1076pb. El uso de Imipenem para el cultivo de EH/ED permite obtener un crecimiento óptimo, mantener la viabilidad del mismo por tiempo prolongado, y la obtención de ADN amibiano de óptima calidad para su uso en biología molecular, evitando el uso de combinaciones de antibióticos.