RESUMEN

Para el cultivo de amiba se utilizan diversos medios que emplean antibióticos para controlar el crecimiento bacteriano. El Imipenem, antibiótico batalactámico, actúa sobre la mayoría de los gérmenes presentes como flora fecal. Se optimizó el cultivo de Entamoeba histolytica/ dispar (EH/ED) utilizando Imipenem, comprobar la vialidad de la amiba con este antibiótico y extraer el ADN amibiano para tipificación. Se inocularon 22 tubos con el medio de Boeck y Drbohlav con 1g de heces positivas para EH/ED, a 12 de ellos se agregó 200 µL de Imipenem (25mg/mL) al inicio y 50 µL diarios y a los 10 restantes 150 µL de una combinación de Penicilina, AmiKacina y Eritromicina (50 µL de cada uno). Se verificó el crecimiento y viabilidad parasitaria mediante tinción con eosina al 1% y contaje en cámara de Neubwer a las 24, 48, 72 horas y 7mo día, con resiembra y lecturas en iguales intervalos. Se extrajo el ADN mediante Kit Wizar SV Genomic de PromegaÒ  y se amplificó con indicadores genéricos. Se obtuvo una diferencia significativa entre el número de parásitos vivos de los cultivos con Imipenem = 6,6x10⁶, 11x10⁶, 17x10⁶ y 21x10⁶ vs. la combinación de Penicilina, Amikacina y Eritromicina = 1x10⁶, 2,8x10⁶, 3,3x10⁶ y 3,3x10⁶ a las 24, 48, 72 horas y 7° días respectivamente (p< 0,05). Se realizó la extracción del ADN y se amplificó con iniciadores genéricos obteniendo una banda de 1076pb. El uso de Imipenem para el cultivo de EH/ED permite obtener un crecimiento óptimo, mantener la viabilidad del mismo por tiempo prolongado, y la obtención de ADN amibiano de óptima calidad para su uso en biología molecular, evitando el uso de combinaciones de antibióticos.

RESUMEN

Los moluscos bivalvos son un grupo de organismos importantes desde el punto de vista pesquero, ya que por ser altamente comercializados, ofrecen amplias perspectivas para la distribución mundial, como alimento de alto valor nutritivo para el hombre. Por otro lado, se reconoce en ellos su característica de ser hospedadores importantes de una gran variedad de especies  parasitarias pertenecientes a los Protozoarios y Helmintos .El objetivo de esta investigación  fue la detección de parásitos  protozoarios en la almeja Polymesoda sólida, presente en el sector de Nasarét, del municipio Mara, Estado Zulia, Venezuela, durante dos épocas del año (seca y lluviosa). Los organismos fueron colectados vivos durante los meses de junio-octubre 2002 y enero-mayo 2003. El estudio parasitologico se baso en observaciones al fresco de muestras intestinales del molusco, utilizando la coloración temporal de lugol y permanentemente de Hematoxilina Férrica. Para la identificación de coccidos intestinales emergentes se empleó la coloración permanente de Kinyoun. Además se realizaron estudios histológicos de gónadas, sifones y branquias, utilizando la coloración de Hematoxilina-Eosina. Los resultados revelaron la presencia de siete especies parasitarias de interés clínico (43%), en el contenido intestinal de Polymesoda sólida. Hubo mayor número de almejas parasitadas durante la época seca (49%) en comparación con la época lluviosa (37%). Las formas evolutivas que predominaron fueron las quísticas del complejo Entamoeba histolytica/Entamoeba dispar, Entamoeba coli, Entamoeba hartmanii, Giardia sp., Iodamoeba sp., Blastocystis sp. y ooquistes de Cryptosporidium sp. La presencia de especies de importancia clínica para el hombre, revela condiciones de contaminación y saneamiento inadecuado en la zona de colecta del bivalvo lo que representa un alerta a su explotación y comercialización, sin ningún tipo de control sanitario.